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飞诺美 phenomenex Lux HPLC 手性色谱柱的保养与使用

更新时间:2026-05-28   点击次数:17次

手性分离用多糖型手性色谱柱

Lux系列直链淀粉和纤维素手性选择器提供了多种互补的选择性,使您能够在反相、极性有机、正相和SFC条件下筛选对映体分离条件。

为什么选择Lux手性色谱柱?

Lux用 途广泛:在正相、极性有机、SFC和反相条件下稳定

Lux坚 固 耐 用:压力稳定高达 300 bar

Lux的高 效 性:高 效 率和负载能力

Lux非常灵活:3μm和5μm预装柱


色谱柱特性

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色谱柱安装

您的液相色谱系统的初始设置对确保色谱柱性能至关重要:

  • 确保您的液相色谱系统满足以下条件:

1. 密封、管线和进样器清洁

2. 已预充管线(没有干燥的管线或气泡)

3. 基线稳定

4. 压强一致

  • 使用 HPLC 级、与色谱柱的出厂溶剂混溶的流动相冲洗液相色谱系统泵和管线。

流动相起始条件检查清单:

1. 使用前,确保 HPLC 级流动相已混合均匀、过滤和脱气。

2. 确保色谱柱出厂溶剂、液相色谱系统内的剩余溶剂和流动相溶剂混溶。

  • 将流速设置为 0.1mL/min(适用于 2.1-4.6mm 内径),安装色谱柱,确保箭头方向与流动方向一致。将流速升高至 0.2mL/min(2.1mm 内径)或 1.0mL/min(4.6mm 内径),保持 5-10 分钟。使用小烧杯收集溶剂。

  • 停止流量并擦洗色谱柱的出样口端以移除任何颗粒,然后再连接到检测器。 

  • 将接头/管件安装到出样口端,并以较低的流速(约 0.2 mL/min)通过至少 10 倍于色谱柱容积的溶剂,同时监测背压。 

1. 压强稳定说明流速一致,压强波动则说明系统中存在气体。

2. 压强 da范围波动可能会冲击和损坏色谱柱,因此,监测压强至关重要。

  • 监测压强和检测器信号,在两者均稳定后,色谱柱可以投入使用。

SFC 色谱柱安装 

1. 将色谱柱安装在 SFC 仪器柱温箱室中

2. 将 SFC 仪器背压调节器设置为大约 80-100bar,并在使用前用至少十倍于色谱柱容积的 SFC 流动相平衡色谱柱 

3. SFC 流动相一种比较好的起始选择是 CO2/甲醇或 CO2/乙醇(体积比为 80:20),带或者不带添加剂均可。 

4. 4.6mm 内径色谱柱的zui 佳流速为 3-6mL/min。我们建议将流速逐渐升高到 3mL/min,以免背压超过 300bar (4300psi)。

溶剂切换 

在从一种流动相转换到另一种时,必xu采用适当的色谱柱清洗程序。在清洗时bi须仔细考虑不同流动相成分的混溶性。建议将 Lux 涂层色谱柱专门用于正相、反相或极性有机模式。不建议在不同的运行条件下来回切换。

正相到极性有机或反相

要将色谱柱从正相安全地转移到极性有机或反相条件,请使用以下程序: 

1. 将流速设为 0.5mL/min

2. 使用 10 倍于色谱柱容积的甲醇/乙醇(体积比为 90:10)冲洗色谱柱

a. 例如,为 250 x 4.6mm 色谱柱使用 25mL

3. 使用至少 10 倍于色谱柱容积的新流动相活化色谱柱。 

**如果您的反相流动相缓冲液的盐在甲醇和/或乙醇中不混溶,请在甲醇/乙醇步骤后使用水简单地冲洗色谱柱,然后使用 10 倍于色谱柱容积的反相或极性有机流动相活化色谱柱。 

反相到正相 

在 Lux 色谱柱(i-Amylose-1 和 i-Cellulose-5 除外)处于反相模式后,不建议从反相切换回正相。

极性有机到正相 

在 Lux 色谱柱(i-Amylose-1 和 i-Cellulose-5 除外)处于极性有机模式后,不建议切换到正相模式。

正相、极性有机或反相到 SFC

1. 使用甲醇/乙醇(体积比为 90:10)并将流速设为 0.5mL/min。

2. 在切换到 CO2 之前,使用至少 10 倍于色谱柱容积的溶剂冲洗。

3. 使用 SFC 溶剂活化时,将流速降低至 0.3mL/min,直至甲醇/乙醇冲出。

SFC 到正相、极性有机或反相

1. 使用甲醇/乙醇(体积比为 90:10)并将流速设为 0.5mL/min。

2. 使用至少 10 倍于色谱柱容积的溶剂冲洗,直至 CO2 被吹出。

3. 然后,使用至少 10 倍于色谱柱容积的新流动相活化。

典型流速、背压、温度

下面是常见规格的 Lux HPLC 色谱柱的一些典型值。这些数字不是绝dui值,并且在不同的液相色谱系统、运行参数和样品分析物/基质下可能不同。以下的数值经由己烷和 IPA 组成的溶剂系统创建。

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背压上限 

• Lux 液相色谱分析柱的建议zui 大压强为 4500psi (310bar),AXIA™制备柱为 3625psi (250bar),不过,压强限值取决于您的运行参数和系统,并且可能发生变化。 

温度上限 

• Lux 液相色谱柱的建议温度上限不超过 50°C,不过,温度限值取决于您的运行参数,并且可能发生变化。

流动相兼容性

Lux 手性固定相(i-Cellulose-5 和 i-Amylose-1 除外)在制造过程中涂有含多糖衍生物的硅胶。因此,即使为痕量,也bi须避免使用任何会溶解多糖衍生物的溶剂,如下所述:

  • 四氢*喃、丙酮、氯化烃类、乙酸乙酯、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、N-甲替甲酰胺、甲苯、甲基乙*酮和甲基叔丁醚等。

  • Lux i-Cellulose-5 和 i-Amylose-1 的固定化部分可以耐受注射到色谱柱上的强极性有机溶剂(例如 DMSO、DCM、乙酸乙酯、MtBE 和 THF),能够显著增强色谱柱的耐 用 性。

Lux 色谱柱在使用含有下述浓度水平添加剂的流动相时,能提供一致的结果。 不过,如果将色谱柱与这些添加剂配合使用,色谱柱柱效可能会出现一定程度的下降。因此,我们建议将色谱柱专 用于含有碱性添加剂的流动相。

对于碱性样品或酸性手性化合物,要实现手性分离并确保正确的峰形,有时候需要适当的流动相改性剂。

1. 二乙胺、乙醇胺和丁胺 (0.1-0.5%) 可用于碱性分析物

2. 三*乙酸或乙酸 (0.1-0.2%) 可用于酸性分析物。 

3. 也可使用碱性和酸性流动相添加剂的混合物(例如二乙胺乙酸盐或三氟醋酸盐)。

色谱柱储存 

储存前,务bi确保您的色谱柱清洁。包括移除缓冲液、盐、样品和离子配对剂。建议的储存条件为: 

  • 反相:可以使用乙腈/H2O(体积比为 85:15)和甲醇替代乙腈。

  • 正相:正己烷/2-丙醇(体积比为 9:1)。

延长色谱柱使用寿命的提示

  • 要在长时间使用 Lux 色谱柱后进行再生或移除潜在污染物,我们建议用 100  % 甲醇或乙醇并以适当的流速将色谱柱冲洗 2-3 小时。也可以使用反向冲洗清洗色谱柱。

  • 利用固相萃取(Strata®-X SPE 产品)等样品制备技术或配件(Phenex™针头式过滤器),以便尽可能减少进入您的系统和色谱柱上的污染物。

  • 使用合适的保护柱、保护柱系统 (SecurityGuard™) 在微粒阻塞您的色谱柱之前将其移除。

  • 不要让色谱柱过载。进样合适的样品浓度和体积。请参见图表:典型载样量

  • 在色谱柱的适当分离模式下工作。请参见色谱柱特性表,了解每种固定相适合的典型模式。

  • 将您的色谱柱储存在合适的溶剂中。

  • 以较低流速从一种混溶溶剂缓慢富集到另一种,正确执行溶剂切换:2.1mm 内径为 0.1mL/min,4.6mm 内径为 0.5mL/min。

典型载样量

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若您在使用飞诺美Lux手性色谱柱过程中遇到任何问题,请及时联系购买的供应商!