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大赛璐CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)特种手性柱使用注意事项

更新时间:2026-05-29   点击次数:16次
本产品建议冷藏,请使用前后将本产品置于冰箱中(3℃-6℃)冷藏保存。

CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)是将冠醚衍生物键合在硅胶表面而制得。本产品对钾离子及类似大小的离子结合是不可逆的,即便微量进柱,也会造成识别位点被占据,任何样品都无保留。因此,在使用前一定要彻di清洗仪器管路、正确配制流动相和样品溶液,并确认样品中无钾离子及类似大小的离子。在使用本产品前请仔细阅读包装盒中的英文版使用说明书。

在连接该手性柱进行实验前,请按以下步骤操作:

1.使用前:

1.1 确认仪器各部件状态:

  • 校准各泵的流速看是否准确。强烈推荐使用单泵(即只使用一个泵),所用的流动相请手配,混合均匀。

1.2 使用溶剂及配制:

  • 使用的水溶剂为色谱级纯净水,高氯酸为色谱纯或分析纯。

  • 配制时建议采用以下操作:往水溶液中滴加入高氯酸,充分混匀,倒出约 50mL 到烧杯中,用 PH 计检测烧杯中的待测溶液,此操作是为避免 PH 计与待配流动相接触,以免 PH 计中残留的钾离子污染待配流动相而导致柱子失去选择性。如此反复操作。配好后充分混匀后请再次检测,以确保溶剂 PH 值在实验规定的范围内。

  • 如果文献方法不是滴定法,请照文献方法配制好流动相(同样要充分搅拌)以后再用 PH 计检测(检测方法同上),确认该溶液 PH 值是否在我们规定的使用范围内。说明书称重法配制的流动相也按此操作。

  • CR-I(+)/CR-I(-)柱所使用的高氯酸水溶液的 PH 范围为 PH1.0-7.0,通常为 PH1.0-2.0。

1.3 样品的配制:

  • 建议使用流动相溶解样品,或者纯水、或者与流动相组成比例接近的水和有机相来溶解样品。

  • 样品溶解后,需要用 0.45µm 孔径的滤膜过滤,确保在使用前无沉淀。

1.4 溶剂切换:

      请在连接色谱柱前,按下述要点彻di做好溶剂切换

  • 根据 HPLC 系统中不同的当前流动相,采用不同的冲洗方法清洗所有管路:包括所有溶剂入口、泵、进样装置和其他连接管路(在进样器和检测器之间用两通代替色谱柱连接起来)。

  • 如果当前流动相是正相流动相(如正己烷/醇),要先用无水乙醇或异丙醇冲洗约 80mL,再用纯水冲洗约 80mL,然后用配制好的测试流动相冲洗 50mL,最后连接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色谱柱。

  • 如果当前流动相是反相流动相(如水/乙腈、缓冲液/甲醇),要先用纯水彻di冲洗(约 100 mL)以除去其中存在的有机溶剂或缓冲液,然后用配制好的测试流动相冲洗约 50 mL,最后连接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色谱柱。

  • 注意:其余未用的流路也bi须过渡为纯水系统,以免误操作时让其他溶剂进入系统,造成严重后果。

2.使用中:

2.1 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱一般以高氯酸水溶液(PH 1.0-2.0)为流动相,其他的酸也可以使用,如三氟yi酸、硝酸、甲酸和乙酸。但一般推荐使用高氯酸,多数情况下,分离度更好,紫外吸收也更低。CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱为键合柱,可在流动相中添加有机相,具体使用请见说明书。

2.2 该手性柱不能接触 K+离子,K+离子会占据冠醚的手性空穴从而不可逆的损坏手性柱的分离能力。

2.3 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱的使用温度范围为:-5℃-40℃,柱压上限为 30MPa,为了您的手性柱有更长的寿命,建议在 10MPa 以内使用。

2.4 强烈推荐使用 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)说明书上提到的保护滤器(Guard filter)。

3.使用后:

测试完成后请用 5%甲醇水溶液以 0.3mL/min 冲洗柱子 100min, 为延长手性柱的使用寿命,请将手性柱保存于 3-6℃冰箱中。

使用中常见问题及解决措施:

1. 样品峰出现分叉情况:

  • 可能造成此现象的原因:

    a) 柱子使用过程中流速过大、压力剧增

    b) 分析样品过程中有残渣污染柱头

    c) 保护柱损坏

  • 可采取的应对方法:

    a) 若有保护柱请将保护柱取下后再验柱

    b) 若还是有分叉现象,请将柱子反接后验柱

若问题依然存在,请及时与供应商联系。

2. 出峰不断提前:

出峰不断提前是填料不断流失的表现,主要是由于流动相的 PH 低于 1.0 或有钾离子进柱,以上情况造成的填料流失是不可逆的损坏,柱子将无法修复。

  • 可能造成此现象的原因:

    a) 泵的抽力不正常

    b) 配制的高氯酸水溶液密度不均匀

    c) 在使用前未用纯水彻di冲洗整个系统(注意:包括所有溶剂入口、泵、进样装置和其他连接管路)

    d) 流动相及样品溶液中有 K+存在

3. 样品没有保留,在 2.0min 左右出峰:

初步断定是手性填料wan全流失的表现,柱子对手性样品没有分离能力,这种损坏是无法修复的。

为了避免以上 2、3 所述情况的出现,请在阅读英文版说明书注意事项的基础上,严格按照我们的中文补充说明操作。


建议客户在拿到柱子后严格按照大赛璐公司的验柱报告用标准品检验柱子,确认柱子性能。

若您在使用大赛璐手性柱过程中遇到任何问题请及时联系购买的供应商!若由于操作使用不当对手性柱造成不可逆损坏,供应商将不承担任何责任!